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TMB在辣根过氧化物酶(HRP)的显色反应体系中，因比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫斑点杂交、免疫组化以及过氧化氢的检测分析。为此，本公司开发了可应用于HRP反应体系的TMB显色液。

• 实验用品应该专一，避免交叉污染；
  
• TMB对人体有刺激性，请注意适当防护；
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 加液：待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3～5次，每孔加TMB显色液A、TMB显色液B各50μL (A、B液先混匀再加入孔中)，轻轻混匀，根据个人实验需要，在室温(15～25℃)或37℃下避光温育1030min或更长时间，直至出现蓝色产物。
  
• 终止：每孔加入50μL(与显色液等体积)1M盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
  
• 读数：终止反应后15min内于450nm处测定各孔溶液的吸光值。
  
  • 如果出现沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
• 对照：空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色；阳性对照为深蓝色。